Après avoir retiré le tube de congélation, il doit être immédiatement placé dans un réservoir d'eau à 37 degrés pour le décongeler rapidement. Secouez doucement le tube de congélation pour le faire fondre complètement en 1 minute. Veillez à ce que la surface de l'eau ne dépasse pas le bord du couvercle du tube de congélation, sinon une contamination peut facilement se produire. De plus, lorsque vous sortez le tube congelé du baril d'azote liquide et que vous le décongèlez, vous devez faire attention à la sécurité pour éviter que le tube congelé n'éclate.
Remarque : Portez des gants pendant l'opération pour éviter les gelures ; portez des lunettes de protection pour éviter l'explosion d'azote liquide du tube qui vient d'être retiré du réservoir d'azote liquide...
Le processus de récupération doit être rapide afin d'empêcher les petits cristaux de glace de former de gros cristaux de glace, c'est-à-dire la recristallisation des cristaux de glace. Une fois les cellules cryoconservées retirées de l'azote liquide, placez-les immédiatement dans un bain-marie à 37 degrés et secouez doucement le tube de congélation pour leur permettre de fondre complètement en 1 minute (pas plus de 3 minutes). Les cellules décongelées peuvent être directement inoculées dans des flacons de culture cellulaire contenant un milieu de culture complet pour une culture directe. Après 24 heures, l'ancien milieu de culture peut être remplacé par un nouveau milieu de culture complet pour éliminer le DMSO. Si les cellules sont particulièrement sensibles aux cryoprotecteurs, les cellules décongelées doivent être centrifugées pour éliminer le cryoprotecteur avant l'inoculation dans des flacons de culture contenant un milieu de culture complet.